Producción de proteínas recombinantes: El modelo de la Taq polimerasa

La expresión de proteínas recombinantes es una técnica biotecnológica notoria, ampliamente usada para obtener altas cantidades de proteínas a bajo costo y cada vez con mejores rendimientos. La primera proteína recombinante que apareció en el mercado fue la insulina humana en 1982. En el presente proyecto se pretende implementar protocolos para la producción de proteínas recombinantes en Escherichia coli utilizando un modelo metodológico claro como lo es la producción de la enzima ADN Taq polimerasa de Thermus aquaticus. El gen de la ADN Taq polimerasa será obtenido por amplificación de este utilizando una cepa de Thermus aquaticus. Posteriormente este gen se clonará en el vector de expresión pET-30a el cual posteriormente se utilizará para transformar una cepa de E. coli. Las bacterias transformadas serán crecidas en medio LB con ampicilina y serán inducidas a la expresión de la enzima utilizando IPTG. La recuperación de la proteína recombinante se realizará a través de procesos de lisis de las células y procesos de centrifugación. La proteína obtenida se verificará por SDS-PAGE y se valorará su actividad biológica utilizándola como reactivo de PCR y comparando su actividad con una preparación comercial de la misma.

Palabras claves: Proteína recombinante, Taq ADN polimerasa, Thermus aquaticus, clonación, transformación.